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履修条件
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細胞生物学の技術を習得し、自らの実験に使用したい者。
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授業概要
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細胞生物学中級編(講義・演習)では、自らの実験に必要な細胞を調製できる。
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In the intermediate course of cell biology (lectures/experiments), you can prepare the cells necessary for your own experiments.
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授業形態 (項目)
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■ 講義・演習 ■ 実験 □ グループワーク・ペアワーク □ 学内外実習 ■ プレゼンテーション ■ ディスカッション □ PBL/TBL
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授業形態 (内容)
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細胞の調製方法、分化誘導方法を教授する。
対面講義・演習の形で実施する。
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使用する教材等
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口腔細胞工学分野に常備している実験プロトコール集を利用すれば良い。各自の必要性に応じて参考書を購入すれば良い(どのような参考書が良いかわからない時は相談に応じる)。
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全体の教育目標
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自分の実験に必要な細胞を自ら調製し、実験に使用することができる。
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個別の教育目標
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授業計画
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1. オリエンテーション:本講義の概要を説明し、細胞培養の基本事項について学ぶ。 2. 初代骨芽細胞の調製:1日齢のマウスから頭蓋冠を摘出し、酵素処理によって初代骨芽細胞を調製する。 3. 初代骨芽細胞の分化誘導:調製した初代骨芽細胞をBMPまたは分化誘導培地で分化誘導する。分化マーカーであるアルカリホスファターゼ染色、および活性測定を行う。 4. 初代骨芽細胞の分化誘導:調製した初代骨芽細胞をBMPまたは分化誘導培地で分化誘導する。アリザリン染色を行い、石灰化の度合いを確認する。さらにギ酸で溶解し、定量化する。 5. 破骨細胞の分化誘導:マウス骨髄細胞を調製し、M-CSFおよびRANKL刺激を行い、破骨細胞を分化誘導する。破骨細胞は酒石酸抵抗性酸フォスファターゼ活性染色を行う。 6. 共存培養:マウス初代骨芽細胞と骨髄細胞を共存培養し、破骨細胞を分化誘導する。 7. 骨吸収能の評価1:共存培養で得られた細胞を象牙片上に播種し、吸収窩の形成をファロイジン染色、ヘマトキシリン染色で判定する。 8. 骨吸収能の評価2:オステオロジックプレート上で破骨細胞を培養し、培養終了後に5%次亜塩素酸溶液で細胞を溶解した後に吸収窩を観察する。
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キーワード
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授業の進め方
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実習の前に実験の目的、原理を説明し、デモを行った後に実践する。
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テキスト
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参考書
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学習相談
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試験/成績評価の方法等
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その他
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添付ファイル
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更新日付
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2026/03/26 09:38
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