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履修条件
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これまで習得した細胞生物学の技術をさらに発展させたい者。
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授業概要
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細胞生物学上級編(講義・演習)では、遺伝子改変、ゲノム編集の技術を応用する。
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In the advanced course of cell biology (lectures/experiments), the techniques of gene modification and genome editing will be applied.
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授業形態 (項目)
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■ 講義・演習 ■ 実験 □ グループワーク・ペアワーク □ 学内外実習 ■ プレゼンテーション ■ ディスカッション □ PBL/TBL
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授業形態 (内容)
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遺伝子導入法、Crispr/Cas9システムを用いたゲノム法を教授する。
対面講義・演習の形で実施する。
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使用する教材等
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口腔細胞工学分野に常備している実験プロトコール集を利用すれば良い。各自の必要性に応じて参考書を購入すれば良い(どのような参考書が良いかわからない時は相談に応じる)。
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全体の教育目標
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遺伝子改変、ゲノム編集を用いた細胞を樹立し、自分の実験に必要な細胞を樹立することができる。
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個別の教育目標
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授業計画
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1. オリエンテーション:本講義の概要を説明し、細胞培養の基本事項について学ぶ。 2. マウス胎仔線維芽細胞(MEF)の調製:胎生13.5日のマウス胎仔をコラゲナーゼ処理を行い、MEFを調製する。 3. 細胞の不死化:MEFを不死化し、cell lineを樹立する。 4. Stable Cell lineの樹立:細胞株に目的の遺伝子を遺伝子導入した細胞株のクローンを樹立する。Killing Curveの書き方、Limiting dilutionを習得する。 5. Tet-ON/OFFシステムを用いた誘導性遺伝子発現株の樹立: 6. Knock Down細胞株の樹立:細胞株に目的の遺伝子のshRNAおよびコントロールshRNAを導入した細胞株のクローンを樹立する。 7. ゲノム編集法を用いた遺伝子欠損株の樹立:Crispr/Cas9システムを用いた遺伝子欠損株の樹立。ガイドRNAの設計、エレクトロポレーションを習得する。 8. ゲノム編集法を用いたノックインの樹立:Crispr/Cas9システムを用いた遺伝子ノックイン株の樹立。
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キーワード
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授業の進め方
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実習の前に実験の目的、原理を説明し、デモを行った後に実践する。場合によって、共同研究者の研究室に派遣し、技術を習得させる。
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テキスト
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参考書
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学習相談
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試験/成績評価の方法等
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その他
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添付ファイル
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更新日付
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2026/03/26 09:33
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